Der Ortsverband Oldenburg ist der größte im Regionalverband Weser-Ems. Mit mehr als 100 hauptamtlichen Mitarbeitern hat er inzwischen die Stärke eines kleinen mittelständischen Unternehmens erreicht. Er ist einer von drei Standorten eines Intensivverlegungswagen (ITW) und organisiert den Blutstammzellentransport für die Johanniter-Unfall-Hilfe. In der Stadt Oldenburg sind die Johanniter Beauftragte im Rettungsdienst. Außerdem bieten die Johanniter gemäß ihrer satzungsgemäßen Aufgabe Kurse in Erster Hilfe, in den Lebensrettenden Sofortmaßnahmen und weitere Angebote. Daneben unterstützen die Johanniter mit dem Hausnotruf, der Ambulanten Altenpflege und dem Menüservice ältere Menschen. Ebenfalls zum Ortsverband Oldenburg gehört das "Jonas-Forum", die Johanniter-Nachbarschaftshilfe und Seniorenberatung, in Kreyenbrück sowie die Betreuung der Bewohner in der Betreuten Wohnanlage der GSG an der Bloherfelder Straße und der Wohngemeinschaft für demenziell Erkrankte am Bloherfelder Markt. Die ehrenamtlichen Helfer sorgen zusätzlich auf Sanitätsdiensten in Oldenburg für Sicherheit und stellen eine Rettungshundestaffel sowie den Fernmeldetrupp mit ELW. Zudem errichtet die GSG Oldenburg zurzeit am Scheideweg eine Kinderkrippe und eine Tagespflege, die nach Fertigstellung beide von den Johannitern betrieben werden.